超凈工作臺在沉降菌測試（TestMeasure)中的應(yīng)用
目的：建立潔凈室（區(qū)）中沉降菌的測試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，保證藥品在規(guī)定潔凈級別的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)。
凈化工作臺用途：廣泛適用于醫(yī)藥衛(wèi)生、生物制藥、食品、醫(yī)學(xué)科學(xué)實驗、光學(xué)、電子、無菌室實驗、無菌微生物檢驗、植物組培接種等需要局部潔凈無菌工作環(huán)境的科研和生產(chǎn)部門。也可連接成裝配生產(chǎn)線具有低噪聲、可移動性等優(yōu)點。
范圍(fàn wéi)：適用于潔凈室（區(qū)）的沉降菌的測試。
職責(zé)：質(zhì)量管理部、QA檢測(檢查并測試)員
內(nèi)容：
1、測試方法
本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時間，在適宜的條件(tiáo jiàn)下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定(assessment)潔凈室(區(qū))的潔凈度。
2、儀器設(shè)備、設(shè)備、培養(yǎng)基
2.1培養(yǎng)皿：Φ90mm×15mm 培養(yǎng)皿
2.2培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基
2.3生化培養(yǎng)箱：必須定期對生化培養(yǎng)箱進(jìn)行校驗。
2.4自動臺式滅菌器：使用時應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說明書操作。
3、測試條件
3.1溫度和相對濕度：潔凈室（區(qū)）的溫度和相對濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)，溫度控制在18℃～26℃，相對濕度控制在45%～65%為宜。
3.2壓差：空氣潔凈度不同的潔凈室（區(qū)）之間壓差應(yīng)≥10Pa。
4、測試狀態(tài)：動態(tài)測試和靜態(tài)測試。靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員(personnel)不得多于2人；動態(tài)測試時，現(xiàn)場人員數(shù)按《潔凈區(qū)人員控制管理制度(institution)》中規(guī)定執(zhí)行，記錄中注明現(xiàn)場人員數(shù)量及測試點位置。
5、測試時間：對單向流，測試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)運行不少于10分鐘后開始；對非單向流，測試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)運行不少于30分鐘后開始。
6、采樣點數(shù)量及布置
6.1**少采樣點數(shù)目
房間面積（m）
潔凈度級別
100
10000
100000
＜10
2―3
2
2
≥10―＜20
4
2
2
≥20―＜40
8
2
2
≥40―＜100
16
4
2
≥100―＜200
40
10
3
≥200―＜400
80
20
6
≥400―＜1000
160
40
13
≥1000―＜2000
400
100
32
≥2000
800
200
63
6.2**少培養(yǎng)皿數(shù)
在滿足**少測點數(shù)的同時，還宜滿足**少培養(yǎng)皿數(shù)，見下表
潔凈度級別
所需Φ90mm培養(yǎng)皿數(shù)(以沉降0.5 h /靜態(tài)或4h /動態(tài)計)
100
14
10000
2
100000
2
6.3采樣點布置類型
6.4采樣點的位置
6.4.1一般布置在離地面0.8-1.5m之間或操作平臺的高度，除受潔凈室（區(qū)）的設(shè)備限制外，應(yīng)在整個潔凈室（區(qū)）均勻布置。
6.4.2每個采樣點一般采樣一次，也可以多于1次。
6.4.3布置采樣點時，應(yīng)避開回風(fēng)口，測試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)。
7、培養(yǎng)基制備
7.1依據(jù)檢測區(qū)域的取樣點數(shù)，按照《培養(yǎng)基配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》制備適量的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
7.2在
超凈工作臺內(nèi)，以無菌操作法將配制好的營養(yǎng)(nutrition)瓊脂培養(yǎng)基以每皿約15ml的裝量分裝，待培養(yǎng)基凝固后移出潔凈區(qū)。
7.3將制備的營養(yǎng)(nutrition)瓊脂平皿倒置于生化培養(yǎng)箱內(nèi)35℃培養(yǎng)48小時，確認(rèn)無菌（fungus)落數(shù)后使用。
凈化工作臺用途：廣泛適用于醫(yī)藥衛(wèi)生、生物制藥、食品、醫(yī)學(xué)科學(xué)實驗、光學(xué)、電子、無菌室實驗、無菌微生物檢驗、植物組培接種等需要局部潔凈無菌工作環(huán)境的科研和生產(chǎn)部門。也可連接成裝配生產(chǎn)線具有低噪聲、可移動性等優(yōu)點。
7.4培養(yǎng)皿傳進(jìn)潔凈室（區(qū)）測試前要進(jìn)行表面消毒(disinfection)。
8、測試
8.1將已制備好的培養(yǎng)皿按采樣點布置圖逐個放置，然后從里到外逐個打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面(appearance)暴露在空氣中。
8.2靜態(tài)測試時，培養(yǎng)皿暴露時間為30min，動態(tài)測試時，培養(yǎng)皿暴露時間為不大于4h。
9、培養(yǎng)：取樣結(jié)束后將平皿倒置于生化培養(yǎng)箱內(nèi)35℃培養(yǎng)72小時，并以未采樣的營養(yǎng)瓊脂平皿作對照皿。
10、結(jié)果計算
10.1 用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。
10.1.1用肉眼對培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計數(shù)、標(biāo)記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用5～10倍放大鏡檢查，有否遺漏。
10.1.2 培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。
10.2 每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)的計算:
=
式中： ---平均菌落數(shù)
M1---1號培養(yǎng)皿的菌落數(shù)
M2---2號培養(yǎng)皿的菌落數(shù)
Mn---n號培養(yǎng)皿的菌落數(shù)
n---培養(yǎng)皿的總數(shù)
11、結(jié)果評定
11.1 每個測點的沉降菌（fungus)的平均菌落數(shù)必須(have to)低于所規(guī)定評定標(biāo)準(zhǔn)的界限。
11.2 在靜態(tài)測試時，若某測點的沉降菌平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)重新采樣兩次，兩次測試結(jié)果均合格才能判為符合。
11.3若測試結(jié)果超標(biāo)時應(yīng)及時與生產(chǎn)部門聯(lián)系，對該區(qū)域進(jìn)行消毒或其它處理，然后重新測試**合格。
11.4潔凈區(qū)沉降菌控制標(biāo)準(zhǔn)(biāo zhǔn)
潔凈度級別
A
B
C
D
沉降菌cfu/4小時
標(biāo)準(zhǔn)
＜1
5
50
100
警戒限
--
3
40
80
糾偏限
--
4
45
90
1、表中數(shù)值均為平均值。
2、單個沉降碟的暴露時間可以少于4小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進(jìn)行檢測(檢查并測試)并積累計數(shù)。
12、注意的地方
12.1采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。
12.2應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。
12.3測試用具要作滅菌（fungus)處理，以確保測試的可靠性、正確性。
凈化工作臺用途：廣泛適用于醫(yī)藥衛(wèi)生、生物制藥、食品、醫(yī)學(xué)科學(xué)實驗、光學(xué)、電子、無菌室實驗、無菌微生物檢驗、植物組培接種等需要局部潔凈無菌工作環(huán)境的科研和生產(chǎn)部門。也可連接成裝配生產(chǎn)線具有低噪聲、可移動性等優(yōu)點。
13、檢測頻率：1次/3個月。
14、附錄
附錄《沉降菌測試（TestMeasure)記錄》
15、歷史修訂記錄和原因
版本號
修訂原因
修訂日期
01
新訂
附錄
沉降菌測試記錄
編碼：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
測試區(qū)域
測試依據(jù)
測試人員
測試日期
培養(yǎng)基用量
測試狀態(tài)
培養(yǎng)時間
培養(yǎng)溫度
報告日期
測試房間
房間編號
現(xiàn)場操作人員數(shù)
采樣點布置類型
沉降菌菌落數(shù)/cfu
符合規(guī)定
a
b
測點1
測點2
測點3
測點4
更鞋間
PLES123
□ 否□
男一更
PLES124
□ 否□
女一更
PLES125
□ 否□
男二更
PLES126
□ 否□
女二更
PLES127
□ 否□
手消毒(disinfection)間
PLES128
□ 否□
外用酊劑線
PLES129
□ 否□
酊劑配制間
PLES130
□ 否□
酊劑灌裝間
PLES131
□ 否□
預(yù)留間1
PLES132
□ 否□
溶液劑灌裝間
PLES133
□ 否□
理瓶、洗瓶間
PLES138
□ 否□
瓶子暫存間
PLES139
□ 否□
洗衣整衣間
PLES140
□ 否□
消毒(disinfection)液配制間
PLES141
□ 否□
不合格品存放
PLES142
□ 否□
潔具存放間
PLES143
□ 否□
模具（稱號：工業(yè)之母）存放間
PLES144
□ 否□
容器存放
PLES145
□ 否□
容器洗滌
PLES146
□ 否□
內(nèi)包材存放間
PLES147
□ 否□
溶液劑配制間
PLES148
□ 否□
半固體配制間
PLES149
□ 否□
廢棄間
PLES150
□ 否□
中檢室
PLES151
□ 否□
中間站
PLES152
□ 否□
稱量間、（前室）
PLES153
□ 否□
稱量、配料間
PLES154
□ 否□
粉碎、過篩間
PLES155
□ 否□
半固體灌裝間
PLES156
□ 否□
原輔料暫存間
PLES157
□ 否□
緩沖室
PLES158
□ 否□
走廊
□ 否□
陰性對照
□ 否□
潔凈度級別
A
B
C
D
沉降菌
cfu/4小時
標(biāo)準(zhǔn)
＜1
5
50
100
警戒限
--
3
40
80
糾偏限
--
4
45
90
備注
沉降菌測試（TestMeasure)記錄
編碼：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
測試區(qū)域
測試依據(jù)
測試人員
測試日期
培養(yǎng)基用量
測試（TestMeasure)狀態(tài)
培養(yǎng)時間
培養(yǎng)溫度
報告日期
測試房間
房間編號
現(xiàn)場操作控制人員(personnel)數(shù)
采樣點布置類型
沉降菌菌落數(shù)/cfu
符合規(guī)定
a
b
測點1
測點2
測點3
測點4
一更
PLEZ120
□ 否□
二更1
PLEZ121
□ 否□
二更2
PLEZ122
□ 否□
緩沖間1
PLEZ123
□ 否□
緩沖間2
PLEZ124
□ 否□
微生物限度室
PLEZ125
□ 否□
凈化操作臺
PLEZ125
□ 否□
陽性對照室
PLEZ126
□ 否□
凈化操作控制臺
PLEZ126
□ 否□
陰性對照
□ 否□
潔凈度級別
A
B
C
D
沉降菌
cfu/4小時
標(biāo)準(zhǔn)
＜1
5
50
100
警戒限
--
3
40
80
糾偏限
--
4
45
90
備注
沉降菌測試記錄
編碼：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
測試區(qū)域
測試依據(jù)
測試人員
測試日期
培養(yǎng)基用量
測試狀態(tài)
培養(yǎng)時間
培養(yǎng)溫度（temperature)
報告日期
測試房間
房間編號
現(xiàn)場操作人員(personnel)數(shù)
采樣點布置類型
沉降菌菌落數(shù)/cfu
符合規(guī)定
a
b
測點1
測點2
測點3
測點4
更衣
PLEQ003
□ 否□
緩沖間1
PLEQ004
□ 否□
取樣間
PLEQ005
□ 否□
緩沖間2
PLEQ006
□ 否□
陰性對照
□ 否□
潔凈度級別
A
B
C
D
沉降菌
cfu/4小時
標(biāo)準(zhǔn)
＜1
5
50
100
警戒限
--
3
40
80
糾偏限
--
4
45
90
備注
